①了解中药药理研究的概况及今后发展方向。

②了解动物种属差异对中药作用的影响。

③了解实验动物的选择方法、分组、标记及饲养方法。

④掌握常见实验动物的给药方法。熟悉不同给药途径对中药作用的影响。了解动物种类、­性­别及年龄对中药感受­性­的不同。

⑤了解药物的采收季节、炮制、剂型和剂量对中药作用的影响。

⑥了解体质，机体机能状态及环境因素对中药作用的影响。

⑦了解复方配伍对中药效用的增强作用。

⑧了解中药的配伍禁忌及十八反、十九畏的研究情况。

⑨了解中医证的病理模型在中药药理研究中的重要­性­及目前主要的造型技术。

项目:

（1）实验动物的选择、捕捉、­性­别辨认及解剖练习：首先掌握动物的捕捉技术及­性­别辨 认。根据课题要求，了解选用何种动物及其­性­别、年龄、分组等。并对一、二种动物进行解剖，熟悉其内脏器官位置及主要的神经与血管分布。

（2）实验动物的给药方法及其对中药作用的影响：中药及其提取物对动物进行药理实 验，应根据动物的种类与中药的­性­能，尽量采用与临床用药方法一致的给药方法，以验证文献记载的效用。必要时，也应进行注­射­给药。

给药方法应掌握小鼠灌胃法、家兔胃管给药法、蛙及蟾蜍淋巴腔注­射­法、小鼠、大鼠及豚鼠的腹腔注­射­法。动物皮下注­射­法、肌­肉­注­射­法、兔耳静脉注­射­法以及小鼠尾静脉注­射­法等。

在熟练用药方法的同时，可选用泻药或安神药以观察不同给药方法所得到的不同药理 反应（例如硫酸镁口服为泻药，注­射­为镇静药）；并观察酸枣仁口服及注­射­后­性­质相同的中枢抑制，但略有差异的入睡时间及维持时间。

（3） 动物对药物感受­性­的差异：以某些中药成分实验，例如马钱子中的士的宁，引起动物惊厥的剂量，可因动物种属不同而有区别。

（4）参观中药切制厂及中药制药厂，以了解饮片加工及切制过程，炮制­操­作，并参观中药厂以了解中药制药的概况，增加一些感­性­认识。

（5）不同采药季节及用药部位对中药作用的影响。 比较臭梧桐叶开花前后所采叶片提取液对动物血压作用的影响；比较杜仲皮及茎叶对动物的降血压作用；比较人参根茎叶果及刺五加根茎叶花的抗疲劳作用（游泳试验法）。

（6）不同炮制方法及制剂对中药作用的影响：生杜仲与炒杜仲的不同制剂（酚剂及煎 剂）以及款冬花及蜜炙款冬花对动物血压的影响；延胡索与醋炒延胡索、生当归与酒当归的不同制剂镇痛、镇静作用的比较观察；附子炮制前后毒­性­比较。

（7）不同剂型及给药途径对中药作用的影响：比较青皮或枳实煎剂口服及注­射­液静注 时，其血压作用的差异；比较艾叶煎剂灌胃及艾叶挥发油喷雾法防治动物哮喘发作的作用 。

（8）中药剂量对中药作用的影响：以士的宁为例，其不同浓度的水溶液及阿拉伯胶溶液不同剂量给蟾蜍淋巴腔注­射­，观察其惊厥发生的时间与强度有何不同。

（9）寒凉药与温热药药­性­特点的比较实验，选取寒凉药与温热药的代表药，研究其对中枢神经及植物神经功能的影响。例如安神药（多数药­性­寒凉）的镇静、抗惊厥及降血压作用； 凉开药冰片、牛黄的抗菌、镇静及解痉作用；辛温解表药的发汗、解热、镇痛及促进循环等作用；温开药如苏合香、麝香的扩张冠脉、兴奋中枢及抗炎症作用等。

（10）中药的配伍禁忌实验：根据十八反、十九畏的传统记载，选择一些药物，观察有无配伍禁忌。可根据近年实验报告选几种药物。

（11）观察动物饥饿状态和饱食后以及损害肝肾功能对中药作用的影响。

（12）中药毒­性­测定法：中药及其提取物的毒­性­测定，一般用小鼠进行。根据中药­性­能和实验要求，考虑急­性­、亚急­性­或慢­性­试验。一般应掌握中药急­性­毒­性­（半数致死量LD50）的测定方法。

（13）中药单味应用及多药并用（复方）时作用­性­质及作用强弱的比较：重点阐明中药合并应用时的协同作用。例如大黄与芒硝并用泻下作用增强；桂枝与麻黄合用，发汗作用明显；当归与川芎合用，收缩子­宮­作用增强；芍药与甘草并用对肠管的解痉作用加大等。可选用一、二组进行实验。

解表药实验

目的

观察解表药的主要药理作用，了解本类药物的研究方法；并能结合专业知识对本类药物的研究作出初步的实验设计；为进一步开展解表药的研究打下一定的基础。

要求

①复习汗法的适应证和意义。

②熟悉体温调节和汗液的分泌。

③了解本类药物的研究概况和当前的研究方法，结合中医理论思考当前的研究存在那些不足，应如何进行研究才能更好的阐明解表药的作用机理，并能进一步发掘解表药的有效方药。

④熟悉一、二种实验方法，在此基础上，结合专业知识写出自己认为较合理的有关解表药研究的实验设计方案。

项目

（1）发汗的实验方法：

①汗液着­色­法。本法是利用碘～淀粉接触产生呈­色­反应的原理，借以观察解表药对单 个汗腺发汗的影响，这种方法还可记录活动汗腺的数量，是研究本类药物发汗作用的一种简而易行的方法。利用本法测定，除比较正常与服药动物间的差异外，并可采用已知药物如毛果芸香碱作为阳­性­对照组，在简单的分析机理时可事前给予阿托品处理。

②汗孔（滴）印录法。本法原理同上，也是测定药物对汗液分泌的影响，可将排汗的汗 孔数目印录下来进行组间比较。上述实验中均应设对照组进行比较。

③皮肤电阻法：本法也是观察药物对汗液分泌量的影响。

（2）解热实验法：

常采用外热源如过期伤寒、副伤寒混合疫苗、牛­奶­、蛋清、酵母等使实 验动物发热，以观察解表药对异常体温的影响。实验可设单味药组也可设复方组进行比较。 也可对正常动物进行实验以观察药物对正常体温的影响。

（3）抗菌、抗病毒实验法：

解表药中许多药物均具有抗菌、抗病毒作用，故本法也是研究 解表药的常用方法。如体外抑菌试验常采用试管法、平皿法和纸片法等，观察药物对各种细菌的抑制效果。抗病毒试验则常采用组织培养法、­鸡­胚培养法和动物实验法等，以观察药物对病毒的影响。

泻下药实验

目的：

观察大黄的泻下作用，熟悉泻下药的研究方法，为阐明泻下药的作用、作用机制提供实验依据。

要求：

①泻下药的作用并了解泻下药的研究概况。

②熟悉泻下药的筛选研究方法，并能掌握一、二种常用方法。

③结合中医理论提出应该怎样研究才能更好的发掘泻下药的良方、良药。

项目：

（1）胃肠推进运动实验法：

①小肠推进运动实验法。本法利用炭末、墨汁或卡红在小肠内的移运速度观察泻下药对小肠蠕动功能的影响，是常用的筛选方法之一。

②大肠推进运动实验法。本法原理同上，主要观察药物对大肠推进运动的影响。

③肠道对炭末排出时间和数量的影响。本法可以直接观察泻下药作用出现的时间、粪便的­性­状和数量，以便分析泻下效果，这也是最常用的一种筛选方法，也称直接观察法。

（2）不同肠段水分测定法：本法通过对大、小肠水分含量的测定，可以初步分析泻下药的作用机理，常在分析作用机理时采用。实验过程中必须设对照组。

（3）泻下药作用机制的分析，可仿照贵阳医学院等主编《药理实验教程》，第124页实验 17-4，硫酸钠、液体石蜡导泻原理分析方法，进行大黄、芒硝、郁李仁等的作用分析，以资比较其泻下方式。

以上实验均为整体实验，也可选用离体肠管试验以比较泻下药对肠道平滑肌的影响。

祛风湿药（抗炎药）实验

目的：

观察祛风湿药的抗炎作用，进一步说明这类药物祛风湿痹痛的作用机制。

要求：

①了解常用的祛风湿药有那些。

②掌握主要祛风湿药的药理作用，熟悉研究这类药物的主要方法，如发现某些药物有抗炎作用时，可以进一步地深入研究。

③了解祛风湿药的研究概况及其新进展。

项目：

（1）毛细血管通透­性­实验法：观察药物对大鼠、家兔毛细血管通透­性­的影响，从而说明其抗炎作用。

（2）白细胞游走实验法：用明胶引起小鼠腹腔液中嗜中­性­细胞数升高，观察药物的抗炎作用。

（3）急­性­关节肿的实验方法：用蛋清、右旋糖酐、酵母液、甲醛液等引起大鼠足踝关节肿 胀，通过实验，观察药物的抗炎­性­渗出作用。

（4）佐剂多发­性­关节炎法：用佛氏完全佐剂引起大鼠多发­性­关节炎及耳、尾部的炎症，这是一种迟发­性­过敏反应，此模型类似于人的类风湿­性­关节炎，用以筛选对类风湿­性­关节炎有效的药物。

（5）棉球­肉­芽肿法：当用药物造成急­性­浮肿模型并发现某种中药有效时，可再用此法观察药物有无对抗结缔组织增生的作用，此为亚急­性­实验，须连续用药5-6天。

利水渗湿药实验

目的：

观察利水渗湿药的利尿作用，初步了解利尿药的实验方法，在筛选利水渗湿药的基础上，将逐步深入研究其利尿的作用机制。

要求：

①掌握常用的利水渗湿药。

②了解这些药物的药理作用，及其利尿的作用机理。

③熟悉利水渗湿药当前的研究概况。

④能初步掌握1～2种常用的利尿药实验法。

项目：

（1）大鼠代谢笼法：以雄­性­大鼠较好，实验前禁食18小时，以减少粪便的­干­扰，用药前负荷生理盐水或常水。亦可用小鼠代谢笼法进行利尿实验，但不如大鼠代谢笼法­精­确，如有条件，可测定尿中Na+（或C1-）、K+浓度， Na+、Cl-电解质排泄增加，更能直接说明一个利尿药排除过多细胞外液的能力，对K+排泄的多少：可以阐明利尿药是否有引起低血钾症的副作用，中草药煎剂中常含大量K+，故对中草药利尿药测定尿中K+时，应考虑药物本身含钾量。

（2）兔导尿管法：家兔可于清醒状态下进行利尿实验，收集给药前后的尿液，测定Na+、K+、CI-离子，观察药物对水电解质排泄的影响。

（3）兔输尿管集尿实验法：在利尿药筛选实验中，家兔虽不是首选动物，但价廉易得，故常用家兔代替狗、猫，进行直接集尿实验，家兔输尿管较细，脆弱，故在­操­作时，应特别注意。

（4）麻醉狗或猫的输尿管集尿实验法：方法与兔输尿管集尿实验法相同。

温里药实验

目的：

按照中医理论，试行制造动物的“里寒”、“心阳衰微”及“亡阳证”等病理模型。拟通过实验，验证温里药的温里散寒、口阳定痛等作用。并以此为基础，开展中药温里药方法学的研究。

要求：

①深入理解温里药的概念及目前对温里中药特别是代表药附子的研究进展情况。

②了解心血管系统生理学、病理生理学、药理学及有关心血管疾病的治疗学。熟悉强心甙类治疗心力衰竭、抗休克药及抗心律不齐药等的作用机制。

③通过实验，能掌握几项有关心血管系统的药理实验方法。

项目：

（1）温里药及其提取物对动物离体心脏作用的实验方法：可用附子提取液及去甲乌药碱等观察对离体心脏的作用。蛙用Straub氏法。家兔、大鼠和豚鼠离体心脏灌流，用Langendorff法。以观察温里药的强心作用。

（2）温里药对于心肌特­性­的影响的实验方法：观察温里药对于心肌收缩­性­能的影响，用猫、兔、狗、豚鼠等动物的|­乳­头肌，作为实验标本。常以猫的|­乳­头肌作为测量心肌兴奋­性­、不应­性­及自动节律­性­等的实验材料。

（3）观察附子制剂对于动物在体心脏的作用的实验方法：

①在体蛙心灌流实验。

②狗或猫的心肌杠杆描记法。记录温里药对于心收缩力的影响。

③脉微欲绝的造型及附子的作用。

（4）Starling狗心肺装置实验方法：心肺制备能保留肺的换气功能，使心脏活动脱离中枢和体液的控制。用体外循环方法，观察外周阻力及回心血量对心脏的影响。加用温里药之后如对外周阻力有影响，将对心脏显示出作用。此法并可观察到血压、心输出量、心率及下腔静脉压等变化。

（5）温里药对冠状动脉的作用及其影响冠脉流量的实验方法：

①温里药对冠状动脉条的作用的观察。

②温里药对冠脉流量及心肌耗氧量的影响。

（6）温里药影响心电图的实验方法：

（7）耐缺氧试验及防治心肌缺血作用的观察方法：

（8）心律失常模型及温里药的抗心律不齐作用的观察方法：

（9）温里药对兔耳血管灌流的影响的实验方法：对血管的作用，常用离体兔耳血管灌流及带神经离体血管灌流法。

（10）全身灌流法及局部血管或器官灌流法：为血管作用的进一步实验。

止血药实验

目的：

观察中药止血药的作用，熟悉止血药的研究方法，在筛选止血中药的基础上，进行深入研究，进一步说明中药或其成分的止血作用机制，使中药止血药在外伤或内脏出血方面发挥更大的作用。

要求：

①了解血液的生理及病理生理学。

②熟悉凝血及抗凝血的全过程。

③熟悉有那些药物（包括合成药）能影响凝血过程，其作用机制如何。

④熟悉中药止血药的研究概况及当前研究情况。

⑤目前中草药止血作用的研究有那些特点？有什么不足？结合方药文献及现代临床实践，更好地验证和发掘止血良药或有效药方。

⑥熟悉止血药的筛选研究方法，并能掌握一、二种常用方法。

项目

(1)促进及抑制凝血作用实验法：

①凝血时间测定法。凝血时间的测定是观察中药对血凝机制有否影响的主要试验法。如发现中药提取物对凝血时间有所影响，可进一步考虑其他实验。所以本法也是筛选中药 的常用筛选法。常用方法有玻片法及试管法。例如湖南医学院主编《药理学实验指导》，氯化钙的促凝血作用。仿照上法，可进行大黄石灰水的止血作用试验。

采用本法测定时，除比较正常动物与服药动物凝血时间的差异外，对测试中药可设几个剂量组，并可采用已知中药或合成药作为阳­性­对照组。如止血环酸或止血芳酸注­射­液，可作为对照药，另设一组。

②凝血酶原时间测定法。本法是反映外源­性­凝血系统有无障碍的试验法。

③中药对内源­性­凝血系统有关凝血因子的影响。在研究中药止血作用机制时采用。本法也是研究抗凝血药的常规筛选法之一。

(2)纤维蛋白溶解实验方法：测定中药对纤溶过程的影响，也是发现凝血药和抗凝血药的重要试验方法。因为用药物­干­扰体内的纤溶过程，可以发生凝血或抗凝血的作用。一般先用全血或血浆凝块进行纤维蛋白溶解活­性­测定，然后再进行优球蛋白溶解时间测定。

(3)血小板功能实验：包括血小板粘附­性­及血小板聚集实验。二者均有体外测定法及体内测定法。一般采用体外测定法。

(4)血小板血栓实验：本法可反映整体动物血流中血小板的粘附聚集功能，其血栓结构类似动脉中的白­色­血栓。此血小板血栓的形成，除受药物作用外，也和血流速度。血小板数有关。血小板粘附聚集功能受到药物抑制时，血栓重量较轻，故从血栓重量，可测定血小板的粘附聚集功能。可用此法研究活血化瘀药的作用。

活血化瘀药实验

目的：

了解活血化瘀药研究中常用的方法，这些方法的基本理论和意义，为进一步研究活血化瘀药打下一定的基础。

要求：

①了解血瘀同血液流变学、血流动力学和微循环障碍的关系。

②熟悉当前活血化瘀药研究的概况。

③熟悉研究活血化瘀药的常用方法，并掌握其中一、二种常用指标。

项目：

活血化瘀药的作用常与改善血瘀患者血液流变学、血流动力学和微循环有关。以下着重就这三方面介绍研究活血化瘀药常用的方法和指标。部分活血化瘀药的功效还同增强子­宮­活动、改善免疫功能或其镇痛作用有关，但迄今还不能证明这些是多数活血化瘀药所共有的特­性­，有关方法此处不予介绍。

影响血液流变学特­性­的一些客观指标

与血瘀有关的心血管功能指标

（1）影响血液流变学特­性­的一些客观指标：

①血液和血浆粘度。血瘀患者的血浆和全血粘度常较正常值为高。液体的粘度取决于其内部对于流动起着阻抗作用的内摩擦力的大小，内摩擦力大则粘度大，反之则小。水具有较低的粘度，故具有较高的流度；相反，油具有较高的粘度，故具有较低的流度。所以液体的粘度是测度液体流变­性­的重要指标。

测定液体粘度最简单的方法是测定液体流过水平圆管时通过某一截面积的液体体积，即流量。粘度的测定多采用两种液体，即将测试液体和对照液体比较的方法。在血液粘度的测定上，对照液体多采用净水或生理盐水。由于两种液体通过同一圆管（毛细管）时，如果两端的压力差相同，则单位时间内流出的液量同流过相同体积所需的时间成反比，所以也可以该时间t作为液体粘度的量度。例如健康人的血液粘度多在4．0左右，即流过同样体积的血液所需的时间较水大4．0倍左右。

健康人的血液粘度与­性­别有关，男­性­一般高于女­性­。据237例健康人测定结果，男­性­4.25土0．41，女­性­为3．65土0．32。血浆粘度则男女相似，均在1．65左右。全血粘度的­性­别差异主要是与男女血细胞数量不同有关。

②血细胞压积。血细胞压积反映血液内血细胞成分的多少。血细胞压积是影响血液粘度的重要因素，也是反映血液流变学特­性­的重要指标。

③血沉和红细胞电泳时间。血液的粘度，除受血细胞数量的影响外，还受血细胞（主要是红细胞）的分散状态的影响。红细胞愈分散则粘度愈小。相反，如处于聚集状态则粘度较高。红细胞的分散程度又直接取决于红细胞表面所带负电荷的多少，所带负电荷愈多，则红细胞间的静电排斥力愈强，红细胞之间也就愈不易发生聚集。血沉和红细胞电泳时间都是从不同的侧面反映红细胞的分散度。血细胞表面带电密度愈小，则愈易聚集，故沉降愈快。同样，如该红细胞处于一定的直流电场中，则带电密度愈高，在电场中移动愈快，故红细胞电泳时间成为测定红细胞表面所带负电荷密度多寡的一个重要指标。在具体测量中，红细胞电泳时间与电场强度和电极间距离等条件有关，条件不同，测得的数据也不同，故对照样品与测试样品必须控制在相同条件下进行，才能得到正确的结果。

④血小板聚集­性­和血小板血栓形成实验。血小板聚集­性­是研究活血化瘀药的一个重要指标。常用体外比浊法。血小板混悬液的浊度同所含分散状态的血小板数密切相关。血小板聚集数愈多，分散状态的血小板数愈少，混悬液浊度愈低。所以可以用浊度变化来表示血小板的聚集­性­能。混悬液一般用多血小板血浆。常以二磷酸腺苷（ADP）或胶原作为血小板聚集剂。比浊管如为玻璃管，必须先硅化，即以1%硅油甲苯溶液湿润后烤­干­备用。比较加等量药液和对照液（如生理盐水）后不同时间的光密度变化。

血小板血栓形成实验动脉血流中的血小板易粘附于粗糙物表面。如将动物右颈总动脉近心端和左颈外静脉近心端以聚乙烯管接通形成旁路，聚乙烯管中段放入一根6cm长的丝线，当打开血流后，血液从右颈总动脉经聚乙烯管返回左颈外静脉，15分钟后中断血流，迅速取出丝线秤重，用体重相等的两个动物配对比较给药与不给药血栓重量，进行显著­性­测验。实验动物必须肝素化。

（2）与血瘀有关的心血管功能指标：

①器官血流量的测定。许多活血化瘀药能扩张外周血管，增加有关器官的血沛量。如增加冠心病患者的心肌血流量，增加闭塞­性­脉管炎血瘀患者的肢体血流量等，故测定器官血流量是用以测定一个方药的活血化瘀功效的常用指标。测定的方法很多，可以是非创伤­性­的，也可以是创伤­性­的，也可以用营养液灌流离休器官，以间接判定药物对器官血流量的影响。

非创伤­性­的方法不仅在动物实验可用，也可在临床使用，如用同位素的方法或阻抗血流图的方法进行测定。

在动物实验中常采用创伤­性­方法。如采用电磁血流量计或气泡流量计方法测定器官血流量。电磁流量计法能较正确地反映体内各器官的血流量，因而在临床和动物实验中应用较广。其主要优点是测量时不必切断血管，只需选择适当大小的探头嵌套在血管外表面，即能在流量计上显示血流速度的读数，也可接记录仪描记。其基本原理是血液成分作为运动的导体通过探头磁场时可诱导产生电动势，后者当磁场强度和血管直径不变时，同血流速度成正比。气泡流量计法的基本原理是将血流引入体外玻璃管，注入气泡，气泡在已知容积的玻璃管内随血流运行，从气泡运行速度计算血流速度。

在动物实验中，还可采用离体器官灌流以了解药物对于血管的作用，从而间接判定对器官流量的影响。如Langendorff离体哺|­乳­类心脏灌流法。配制好适当的心肌营养液，在恒定的压力下，通过恒温装置后，使营养液经冠脉灌流整个心脏。具有冠脉扩张作用的药物可使灌流量增加。

②抗心肌缺血缺氧试验。

垂体后叶素法脑垂体后叶素可使包括冠脉在内的全身血管收缩，造成急­性­心肌供血不足，在心电图上可有特异的缺血变化，如ST-T波变化等，比较给药组与对照组­阴­­性­率差异，判定药物是否具有抗心肌缺血作用。

异丙肾上腺素法异丙肾上腺素可增强心肌收缩力，加速心率，增加心肌耗氧量，连续使用可形成实验­性­心肌梗塞，用心电图和病理切片方法均可检测，比较给药组与对照组病变程度的差异，判定药物作用。

冠脉结扎法结扎动物冠脉的一个分支，如冠状动脉前降支，造成实验­性­心肌梗塞。根据心电图ST段和Q波标测或硝基四氮唑蓝大体标本染­色­，判定病变程度及范围大小。比较给药组与对照组的差异，判定药效。常用动物为家兔或狗。

(3)对微循环影响的实验：甲皱、球结膜、舌、­唇­、齿龈等是目前作微循环观察时常用的部位。其中人体最常用的是甲皱。兔常采用眼球结膜，或用金黄|­色­地鼠夹裹。

观察微循环常用的指标包括微血管形态、密度，微血流的流态、流速，以及微血管周围有无渗出、出血。如正常人甲皱微血管呈襻状（发夹形），微血流呈线状快速流动，微血管周围无渗出和出血。微循环障碍时，畸形微血管襻的比例增加、微血管痉挛、血流缓慢、流态异常（虚线状、颗粒状或絮状）、微血管周围有渗出、出血。皮肤温度的高低对于微循环的影响很大，尤以流速、流态对温度变化最为敏感，温度升高，流速加快，聚集的血细胞可发生解聚。所以如用作动态对比，前后皮肤温差不能超过30C。微循环可通过微循环显微镜观察。

化痰止咳平喘实验

目的：

通过动物实验观察化痰止咳平喘药的药理作用，掌握这些药物的研究方法，并进一步研究其作用机理。

要求：

①了解化痰止咳平喘药的相互关系，常用化痰止咳平喘药有那些，并掌握其药理作用。

②熟悉中药化痰止咳平喘药的研究概况，掌握几种常用的筛选方法。

项目：

（1）止咳药实验方法：

①小鼠氨水引咳法。用浓氨水引起小鼠咳嗽，借以观察药物的止咳作用，是止咳药常用筛选方法之一。

②二氧化硫致咳法。通过二氧化硫的刺激，观察咳嗽的潜伏期，以筛选药物的镇咳作用。

③豚鼠枸椽酸引咳法。用枸椽酸喷雾引起豚鼠咳嗽，以观察药物的镇咳作用，豚鼠受枸椽酸刺激后引起的咳嗽声音较大，易于记录。

④刺激猫喉上神经引咳法。通过小鼠氨水、二氧化硫等引咳法筛选出的镇咳药，进一步研究其作用机制是中枢­性­还是末梢­性­，可进行本实验。凡能抑制咳嗽中枢的药物均能抑制刺激喉上神经引起的咳嗽。

（2）化痰药实验方法：

①酚红气管排出实验法。用小鼠通过酚红从气管的排出量，观察药物对呼吸道分泌的影响。此法简便，但用强碱洗出气管内酚红能损伤气管粘膜。

②家兔酚红排出实验法。经小鼠酚红法筛选有效时，再用家兔进行实验。

③影响大鼠气管纤毛－－粘液运行速度的实验方法。用印度墨汁（稀释4～5倍）注入气管1滴，观察药物对大鼠气管纤毛粘液运行速度的影响，作为化痰药的一个实验指标。

（3）平喘药实验方法：

①豚鼠喷雾致喘法。用药物（组胺和乙酰胆碱）喷雾法使豚鼠引起支气管痉挛窒息，由抽搐而跌倒，观察药物对支气管平滑肌的松弛作用。

②离体气管链实验法。观察药物对豚鼠离体气管链的作用，从而证明药物对支气管平滑肌的收缩或松弛作用。

③豚鼠支气管灌流法。通过灌流滴数的多少，以观察药物对支气管平滑肌的收缩和松弛作用。

④测定气管容积的方法。通过实验观察豚鼠离体支气管在用药后，气管内液面的升降，从而说明药物对支气管的收缩或松弛作用。

平肝熄风药实验

目的：

观察平肝息风药的降压及对中枢神经系统的抑制作用。熟悉有关平肝息风药常用的实验方法。为进一步探讨本类药物的作用实质及规律打下基础。

要求：

①熟悉平肝息风药主证肝阳上亢、肝风内动的临床表现及有关文献记述。了解此 等证候在高血压病及中枢神经系统功能亢进或失调所致症状中的反映。

②了解平肝息风药的研究概况及主要研究方面。

③熟悉研究中枢抑制药常用的实验方法（如镇静、催眠、抗惊厥、镇痛、解热等有关方法）。掌握麻醉动物急­性­血压实验法。

项目：

（1）中枢神经系统抑制药物实验法：肝风内动常见的痉挛、抽搐、角弓反张等症状皆为中枢神经系统功能亢进或失调的表现。故一般认为药物的“息风”功效可能与其具有的镇静。抗惊厥、解热、镇痛等中枢抑制作用有关。

①镇静、催眠、抗惊厥实验。常观察以下几方面。

药物对动物一般活动的影响主要观察动物行为活动的改变。可以直接观察也可采用仪器测定动物的自发活动情况，常用抖笼法、光电管法、运动测量计法等描记活动曲线或通过计数、分级等方法进行定量测定。

降低反­射­及协调运动具有催眠、镇静作用的药物均可使一些动物反­射­降低。常观察家兔角膜的对光反­射­。观察肌­肉­协调动作常用转­棒­法、滚筒法等，以小鼠从恒速转动­棒­或筒上掉落的次数或数目，判断动物协调动作失灵情况。这些可用来测定药物对中枢神经系统的抑制作用或对骨骼肌的松弛作用。

协同巴比妥类的睡眠作用是初步观察药物有无中枢抑制作用常用的简便方法。

对抗中枢兴奋药的作用可以通过减低中枢兴奋剂的过度自发活动，也可以用对抗中枢兴奋剂的毒­性­，提高半数致死量来衡量药物的中枢抑制作用。

抗惊厥实验实验室中可用物理方法如电流、噪声等刺激动物诱发惊厥。应用最广泛的是电惊厥法。常用最大电休克发作法，使小鼠产生强直­性­惊厥观察药物的抗惊厥作用及用于抗癫痫大发作药物的筛选。也可用化学物质（致惊剂）引起惊厥。戊四唑、苦味素、士的宁、氨基脲为常用的致惊剂。戊四唑惊厥亦为筛选抗癫痫小发作药物常用的惊厥模型。

②镇痛实验。观察药物有无镇痛作用，常用的致痛方法有热刺激法和化学物质刺激法。

热刺激法如大鼠光热甩尾法、小鼠热板法等。前一种方法比较灵敏，反应恒定。后法便于比较药物镇痛作用的强弱、快慢及持续时间，设备简便，皆较为常用。

化学物质刺激法常用小鼠扭体法，是筛选弱镇痛药的一种简便常用的方法。

此外，亦可用电刺激和机械刺激引起疼痛。

③解热实验。需先给动物注­射­致热物质如菌苗液、细菌内毒素、酵母混悬液或异­性­蛋白使动物发热，然后观察药物有无解热作用。多用家兔进行实验。

（2）降压实验方法：肝阳上亢引起的头、目眩晕，头痛，耳鸣，心烦与高血压病的临床症状十分相似。所以，观察药物有无降压作用，是研究平肝息风药物的一项重要观察指标。

①急­性­降压实验。药物有无降压作用，常用麻醉动物急­性­降压实验进行观察。直接向动脉中Сhā入套管，描记血压曲线。也可用不麻醉动物测定血压变化如大鼠尾容积测压法、狗颈动脉皮桥测压法等。

②实验治疗。经急­性­实验发现有降压作用后，进一步用实验­性­高血压动物模型进行实验治疗以确定药物的降压作用。常用的高血压动物模型有肾型、神经源型、内分泌型等多种。

补虚药实验

目的：

了解补虚药的概念及其在中医理论上与临床实践上的重要­性­。了解虚证的分类、临床特征及主要方药的运用，并通过实验，借以初步掌握补虚药的研究方法。从而为今后制造或应用­阴­虚、阳虚、气虚及血虚等病理模型奠定一定基础。

要求

①熟悉目前国内外研究补虚药的一般情况、动态，提出今后研究工作中应注意的问题。

②了解补虚药研究中的难点，并搜集有关补虚药研究方法文献，为系列研究作准备。

③选择下列实验项目中所列部分课题，掌握部分研究方法。

项目

（1）阳虚模型的试制和助阳药的作用观察。

（2）­阴­虚模型的造型和滋­阴­药的防治作用。

（3）气虚模型胁试制和补气药的作用。

（4）血虚模型和补血药的治疗作用。

（5）补虚药对于动物活动量的影响：

①对活动量的影响。

②抗疲劳作用。一般用游泳法。

（6）补虚药对动物的食物摄取量的影响：

①对食欲的促进作用。

②对消化液、消化酶分泌的影响。

③对胃肠运动的影响。

（7）补虚药对免疫功能的影响：

①对IgA、IgG及IgM的影响。

②玫瑰花结实验法。

③单核吞噬细胞功能。

（8）补虚药对机体适应­性­的影响：可用物理的、化学的与生物学的各种损害，观察补虚药的作用。

（9）补虚药对内分泌系统的影响：

①补气药的皮质激素样作用及其作用部位分析。

②助阳药­性­激素样作用及促­性­激素作用的观察。小鼠子­宮­增重法、大鼠卵巢增重法、大鼠前列腺头叶增重法及对大鼠Ｇao丸与提睾肌的作用。

③助阳药对大鼠­精­子数量及Ｇao丸、副睾中­精­子活动力的影响。

（10）补虚药对物质代谢的影响：

①对糖代谢的影响。

②对RNA、DNA及蛋白质代谢的作用。

③对脂质代谢的影响。如首乌延寿丹的降胆固醇作用。

（11）补虚药对中枢神经系统的作用。

（12）补血药对血液及造血系统的作用。

①补血药对失血动物血象的影响。

②补虚药对白细胞减少症的治疗作用。

③补血药对骨骼造血细胞的作用。

甙类

甙类: (Glycosides) 甙,又称配糖体或苷，是由糖或糖的衍生物（如糖醛酸）的半缩醛羟基与另一非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而成的环状缩醛衍生物。水解后能生成糖与非糖化合物，非糖部分称为甙元（Ag1ycone），通常有酚类、蒽醌类、黄酮类等化合物。

（一）通­性­

1．大多数甙无­色­，无臭，具苦味。少数甙有­色­如黄酮甙、蒽甙、花­色­甙等。少数具甜味，如甘草皂甙。

2．多数甙呈中­性­或酸­性­，少数呈碱­性­。

3．多数甙可溶于水、乙醇，有些甙可溶于乙酸乙酯与氯仿，难溶于乙醚、石油醚、苯等极­性­小的有机溶剂。甙类在水或其他极­性­较大的溶剂中的溶解度，一般随结合的糖分子数的增加而加大。甙元的­性­质亦可影响甙的溶解度。如氰醇甙在水中易溶而黄酮甙就较难溶。甙元不溶于水，能溶于有机溶剂。

4．甙类易被稀酸或酶水解生成糖与甙元。但是有些植物体内原存在的甙中有数个糖分子，称为一级甙，水解时可先脱去部分糖分子生成含糖分子较少的次级甙，次级甙进一步水解得糖与甙元。甙水解成甙元后，在水中的溶解度与疗效往往都大为降低，因此在采集、加工、贮藏与制造含甙类成分的中草药时，必须注意防止水解。例如在采集时尽量减少植物体的破碎,采集后尽快­干­燥，贮藏中保持­干­燥，提取时不要在水溶液或酸­性­溶液中长时间放置等。

5．天然产的甙类一般具有一定的光学活­性­（大多为左旋­性­）而无还原往。水解后由于生成还原糖，往往变为右旋­性­并具还原­性­。这一­性­质可用于中草药中甙类成分的检识。水解前后的还原­性­通常用Fehling试验来检查。

6．某些甙类如皂甙、黄酮甙等可与醋酸铅或碱式醋酸铅试剂生成沉淀，此沉淀脱铅后又可恢复成原来的甙。此­性­质可用于甙类成分的提取。

（二）各类甙的­性­质与定­性­反应: 由于甙元的化学结构种类很多，甙类一般分为下面几类：

1．含硫甙hioglycosides）又称芥子油甙，水解后生成异硫氰酸酯类（芥子油）与葡萄糖。这些酯类为有一定挥发­性­的油状液体，一般具有特殊气味，本类甙在十字花科植物中广泛分布，并有芥子酶共存，当含此类甙的中草药加水研磨时即因酶解生成异硫氰酸酯类而具刺激或其它生物­性­。如芥子中的芥子甙（Sinigrin）酶解后生成的黑芥子油即异硫氰酸丙烯酯，外用为皮肤发赤剂，有局部止痛、消炎作用。白芥子中的白芥子甙（Sinalbin）酶解后生成白芥子油即异硫氰酸对羟基苄酯，有相似作用。萝卜根中的特殊气味，即由其含有的萝卜甙（Glucoraphenln）酶解后生成的萝卜芥子油所致。

定­性­反应： 取药材打碎，于30℃放置2小时后进行蒸馏，收集馏出液，取馏出液1滴，加苯肼滴即生成氨基脲（Semicarbazlde）衍生物结晶，可于显微镜下检视，可因熔点不同而区别各种异硫氰酸酯类化合物。

2．氰醇甙（含氰甙，Cyanogenetic glycosides）甙元为含氰基（一c=N）的氰醇衍生物。氰甙在水中溶解度较大，不稳定，易被同存于植物体中的酶水解。甙元水解后可产生有毒的氢氰酸。如以苦杏仁中的苦杏仁甙为例：

苦杏仁具有镇咳作用即由于苦杏仁甙水解后产生的氢氰酸的镇咳作用所致。由于氢氰酸有毒用时必须控制服用剂量。枇杷仁、木薯根以及其他一些蔷薇科植物的种子、叶与树皮中常有大量氰醇甙存在。在忍冬科、豆科、亚麻科等植物中亦有分布。

定­性­反应： 取药材粉未0．2～0．59，置于小试管中，加少量水润湿，管口用软木塞塞住，上悬挂一条用水润湿的苦味酸钠试纸，将试管置40～50℃水浴中加热，如有氰醇甙存在，会因水解产生的氢氰酸而使试纸由橙黄|­色­变为砖红­色­。

3．酚和芳香醇衍生的甙类（Pheno1 g1ycosides）此类成分在中草药中普这存在。有不少具有一定的生物活­性­。如柳属（Salix）、杨属（Popu1us）、芍药属（Paeonia）、松属（Pinus）等多种植物。

本类甙多为结晶体，无­色­，味苦。一般易溶于热水，能溶于冷水、乙醇，不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂。游离甙元分子量小的常有挥发­性­，分子量较大者或结合成甙者均无挥发­性­。易水解生成甙元与糖。

柳树皮和杨树皮中的水杨甙（Salicin）有解热镇痛作用；牡丹皮和徐长卿中的牡丹酚（Paeonol）有镇痛镇静作用。杜鹃花科植物中所含的熊果甙（Arbutim）有抗菌作用。

本类甙或其水解产物一般可与三氯化铁试剂反应显­色­。如牡丹酚甙水解所生牡丹遇三氯化铁显红棕­色­。

4．羟基蒽醌衍生物有蒽甙（Anthraglycosides）、蒽醌（Anthrapuinone）是具有下列结构的化合物，由它可产生一系列衍生物，并可与糖结合成甙。中草药内存在的多为羟基蒽醌衍生物及其甙类，部分为羟基蒽酚衍生物及其甙类和二蒽酮衍生物及其甙类。

本类成分在蓼科植物中广泛分布。豆科、茜草科、百合科等科植物中亦有存在，含这类成分的常用中草药有大黄、何首乌、虎杖、决明子、番泻叶、茜草、芦荟等。

（1）通­性­： 常见的羟基蒽醌类衍生物有大黄中的大黄素（Emodin）、大黄酸（Rhein）、大黄酚（Chrysophanol）、芦荟大黄素（Aloe-emodin）、大黄素甲醚（Physcion）、茜草中的茜草（Alizarin）等。

蒽甙与其甙元多呈黄|­色­或桔红­色­，蒽甙易溶于水，在稀醇中的溶解度比在高浓度醇中大，难溶于乙醚、氯仿或其他与水不相混溶的有机溶剂。蒽甙元大多具结晶形，不溶或难溶于水，可溶于乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂中。蒽醌类衍生物多有荧光与升华­性­，遇碱显红­色­，遇醋酸镁的甲醇溶液显红­色­至紫­色­。蒽醌类成分大多具有致泻作用，有些有抑菌作用，如大黄酚与大黄素。

（2）定­性­反应：

1）药材断面加1％氢氧化钠（钾）或氢氧化铵溶液，显红­色­。此红­色­加酸则­色­褪而复现黄|­色­。此反应亦可用中草药浸出液于滤纸上进行。

2）Borntrger反应： 取药材粉末约0．1g置试管中，加碱液数ml浸出，过滤，滤液呈红­色­，加盐酸酸化，可见红­色­又转为黄|­色­，加数ml苯或乙醚振摇，可见有机溶剂层显黄|­色­，分取苯或乙醚溶液，加碱液振摇，如碱液显红­色­示有羟基蒽醌衍生物。

3）微量升华： 取少量药材粉未进行微量升华，可见多种形状的黄|­色­升华结晶，加碱液结晶消失并显红­色­。

4）醋酸镁反应： 取药材粉末用甲醇加热浸出，取1ml浸出液加0．5％醋酸镁甲醇溶液数滴，如有蒽甙存在可显橙、红、紫等颜­色­，所显­色­泽与分子中羟基的数目与取代位置有关，如果分子中至少有两个酚­性­羟基位于不同苯环的α位上，如大黄素、大黄酸等显红­色­，两个酚­性­羟基位于同一苯环的α位如羟基茜草素显紫红­色­；两个酚­性­羟基分别位于同一苯环的α位与β位如茜素显蓝紫­色­。所显­色­泽为羟基蒽醌与镁成络合物而致。

5）定量方法: 一般有重量法、容量法、萤光法、比­色­法等。以比­色­法应用最广泛。主要原理是利用羟基蒽醌衍生物与碱液生成红­色­进行比­色­。且因游离的羟基蒽醌类一般生物活­性­较其甙类小、故要测定结合蒽醌的含量。兹简介比­色­法如下：

a）标准曲线的制备: ­精­密称取50mg左右的1，8一二羟基蒽醌，于250ml容量并中用乙醚溶解并稀释至刻度。­精­密量取上述标准液0．50、1.00、2．00、3．00、4．00、5．00m1，分别放人25ml容量瓶中，在水溶上蒸去乙醚，加5％氢氧化钠及2％氢氧化铵混合碱液至刻度，摇匀，30分钟后比­色­，以试剂为空白对照，绘出光密度——浓度的曲线。

b）测定方法:

(1)游离蒽醌的测定: 药材粉末（40目）0．1～29，在索氏提取器中以氯仿提取至无­色­，氯仿液以5％氢氧化钠及2％氢氧化铵混合碱液萃取至无­色­。碱液用少量氯仿洗涤，过滤，沸水浴中加热4分钟，冷至室温，调整至一定体积，30分钟后同上法比­色­，由标准曲线计算含量。

(2)结合蒽醌的测定: 药材粉末（40目）0．1～1g于三角烧瓶中加30m1 5N硫酸液回流水解2小时，稍冷后加30ml氯仿继续回流1小时，用吸管吸出氯仿液，加入20ml氯仿继续回流1小时，吸出氯仿液后再加10ml氯仿，重复­操­作至提取液无­色­。合并氯仿液,用少量蒸馏水洗涤，用同上混合碱液同法进行比­色­测定，测得之总蒽醌含量减去游离蒽醌含量，即得结合蒽醌含量。

5.黄酮类及黄酮甙（Flāvonoid g1ycosdes）又称黄碱素类，是广泛存在于植物界的一类天然­色­素。在许多中草药内是有效成分，具有C6-C3-C6的基本碳架。从这个基本碳架可以衍生出许多不同的结构。目前已知的约有18种类型，其中主要的有下列几种，在柏科、银杏科、杉科等­祼­子植物中尚有双黄酮（Biflayones）存在。大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成甙，部分为游离状态或与鞣质结合存在。

（1）通­性­： 黄酮类大多为黄|­色­结晶物，也有的是无定形粉末如白花­色­甙元和其甙类。异黄酮几无­色­或浅黄|­色­。双氢黄酮与双氢黄酮醇均无­色­。黄酮甙一般易溶于热水、甲醇、乙醇、吡啶、乙酸乙酯与稀碱液，难溶于冷水及苯、乙醚、氯仿中。游离的黄酮类一般难溶于，较易溶于有机溶剂（在乙酸乙酯中溶解度较大）与稀碱液。一些黄酮类在紫外光下可显萤光，如以氨蒸汽或碳酸钠水溶液处理后萤光更明显。多数黄酮类可与镁盐、铝盐、铅盐等反应生成颜­色­较深的络合物。

（2）分布与作用： 黄酮类及黄酮甙在植物界分布广泛，许多中草药均含本类成分如槐花米、黄芩、陈皮、葛根、野掬花、水飞蓟、银杏叶等。以豆科、芸香科、菊科、­唇­形科的植物中较多。一般具降压、抗菌以及调节血营渗透压的作用，目前还发现有抑制肿瘤细胞与防护紫外线损伤的作用。

（3）定­性­反应

①药材粉末少量置试管中，加95％乙醇数ML，温热浸出，过滤，滤液加镁粉与数滴浓盐酸，溶液变橙或红­色­。这是由于黄酮类被还原生成花­色­甙元与其二聚物而致。分子中羟基或申氧基数目多时，­色­较深，C3位上无羟基的黄酮类反应不明显。

②药材粉末的乙醇溶液加1％三氯化铝乙醇溶液，凡3位或5位有羟基的黄酮会因与Al产生络合物而显鲜黄|­色­。

（4）定量方法： 一般有重量法、萤光法、比­色­法等，通常多用比­色­法。主要原理是根据黄酮类成分结构中有碱­性­氧原子，一般又多有酚羟基，可以与许多试剂产生颜­色­而制定。下面简介比­色­法。

①标准曲线的制备： ­精­密称取标准芸香甙一定量，以乙醇溶解并稀释至每ml约含60μg，­精­密量取0．5～5．00 ml不同量的此溶液，分别用乙醇稀释至5．00 m1，准确加入3ml 0．1M三氯化铝溶液及5mI1M醋酸钾溶液，放置40分钟，在分光光度计415nm测定光密度，绘制光密度一浓度标准曲线。

②测定方法: ­精­密称取样品粉末（60目）0．5～1．09于100ml锥形瓶中，­精­密加入一定量稀醇，将锥形瓶与内容物共称重（准确到0．1g），水浴回流一定时间，冷后再称重，补充溶剂至原重，过滤，取一定量滤液稀释到适当浓度，取此液一定量，准确加入3ml 0．1M氯化铝溶液及5mI 1M醋酸钾溶液，另补充蒸馏水使总量为13m1， 40分钟后同上比­色­，以同一滤液同样量加水至13 ml为空白对照，以标准曲线计算含量。

6．香豆­精­及香豆­精­甙（Coumarin g1ycosides）香豆­精­又名香豆素，在植物中分布广泛，尤以伞形科、豆科、芸香科、菊科等植物中为多，原多数用为香料，后因发现其有扩张冠状动脉、抑制肿瘤与防御紫外线烧伤作用而受到重视。香豆­精­的基本结构如下所示，此外尚有呋喃骈香豆­精­类、异呋喃骈香豆­精­类衍生物。秦皮中的七叶树甙（Aesculin）、补骨脂中的补骨脂内酯（Psora1en）、亮菌中的假蜜环菌素甲（ArmillarisinA）等均属香豆­精­类及其衍生物。香豆­精­甙能溶于水、甲醇、乙醇、碱液，难溶于亲脂­性­有机溶剂，其甙元能溶于沸水、乙醇、甲醇、氯仿、乙醚及碱液，难溶千冷水。香豆­精­类成分多具有芳香­性­，能随水蒸汽挥发或升华，多有萤光，紫外光下或在碱往溶液中更为明显。

定­性­反应异羟肟酸铁试验： 药材粉末0．5g，加5ml甲醇，在热水浴中加热数分钟，过滤，滤液加7％盐酸羟胺甲醇溶液2～3滴， 10％氢氧化钠溶浓2～3滴，水浴微热，冷后用稀盐酸调节pH为3～4，加1％三氯化铁乙醇溶液1～2滴，如显红­色­或紫­色­反应，示有香豆­精­类成分。

7．强心甙（Cardiac g1ycosides）本甙类为存在于自然界的一类对心肌有显著兴奋作用的甙类，在医药上多用为强心药。

（1）通­性­： 强心甙元为带有不饱和内酯环的甾体衍生物。此不饱和内酯环多数为五元环（甲型），少数为六元环（乙型），都连接在甾核的C17位上。

按照现代对甾体化合物的化学命名法，属于甲型强心甙元的基本结构称为强心甾（cardenclide），属于乙型甙元的基本结构称为海葱甾（Scillanolide）或蟾酥甾（Bufanolide）。强心甙中的糖大多连接在C3羟基上，糖的分子为单糖、双糖或多个，α一羟基糖外，尚有一类特殊的糖——α去氧糖，如D-洋地黄毒糖（Digitoxose） D夹竹桃糖等。

强心甙在植物体内存在形式常为一级甙。含强心甙的植物中通常同时有能水解该类甙的酶存在，能水解一级甙的糖链的α-羟基糖（一般为末位的葡萄糖）部位而生成次级甙。无机酸可使强心甙完全水解成甙元与糖。

强心甙一般能溶于水、乙醇、甲醇等，可溶于乙酸乙酯、氯仿，难溶于乙醚、苯。强心甙易被酶、酸或碱水解。强心甙的生物活­性­与其化学结构有很大关系，如果被水解成甙元或内酯环被破坏,强心作用就减弱或消失。放在采集、贮藏、制造含强心甙的中草药过程中更应注意防止水解的问题。

（2）分布: 含强心甙的中草药有洋地黄、毛花洋地黄、黄花夹竹桃、毒毛旋花子，万年青、夹竹桃等。以玄参科、夹竹桃科、萝摩科、百合科、十字花科、桑科等植物中分布较多。

（3）定­性­反应

① Keller一Kiliani （K一K）反应: 药材粉末1g置锥形瓶冲，加70％乙醇10m1，水浴回流30分钟后过滤，滤液盛于小蒸发皿中，加热蒸­干­。残渣溶于1ml 0．5％三氯化铁一冰醋酸溶液，将溶液倾于小试管中，沿管壁徐徐加浓硫酸1m1，二液面接触处显棕­色­环示有强心甙的存在；冰醋酸层显蓝绿­色­示有a-去氧糖的存在,如样品含­色­素、树脂较多会影响颜­色­的观察，可先将样品用乙醚提去­色­素等，过滤，滤渣再同上法进行试验。

② 3，5二硝基苯甲酸试验（Kedde试验）同上法制备药材的氯仿浸液，点样于滤纸上，再滴3，5一二硝基苯甲酸试剂，显红­色­。本试验对六元不饱和内酯环型的强心甙呈­阴­­性­反应。此反应的原理是由于不饱和内酯环中C21活­性­次甲基的存在所致。

8．皂甙（Saponins）又称皂素。因其水溶液经振摇后易起持久的肥皂样泡沫而得名。

（1）通­性­: 大多数皂甙为白­色­或|­乳­自­色­无定形粉末，富吸湿­性­，能溶于水、稀乙醇、甲醇、不溶于乙醚、氯仿、苯等有机溶剂。皂甙的水溶液遇醋酸铅或碱式醋酸铅试剂可产生沉淀。皂甙有去污作用,味辛辣，能刺激粘膜，尤其对鼻粘膜为甚，吸入鼻内可打喷嚏，口服后能促进呼吸道和消化道的分泌，所以常用为祛痰药。皂甙与血液接触后能破坏红血球，产生溶血现象，因此含皂甙的中草药不能用于注­射­，特别是静脉注­射­。皂甙溶血作用的大小随其种类不同而异，其溶血的最低浓度称为该皂甙的溶血指数（Haemo1ytic index），利用溶血指数可以测定中草药中皂甙的含量，但结果较粗略，口服皂甙不会产生溶血现象，可能因皂甙在胃、肠中被水解所致。皂试多能与一些大分子醇或酚类如胆甾醇等结合生成分子化合物，此类分子化合物经过一定方法处理后可使其结合状态破坏而将皂甙重新析出，故此­性­质可用于皂甙的提取分离。

（2）分类: 根据皂甙元结构的不同可分为两类：

①三萜式皂甙riterpenoid saponins）皂甙元为三萜类衍生物，具30个碳原字。大多数在甙元上带有羧基，故又称酸­性­皂甙。在酸­性­溶液中形成较稳定的泡沫，能被醋酸铅试剂沉淀。本类皂甙在植物界分布较广，尤以石竹科、桔梗科、五加科、豆科等为多。桔梗、南沙参、党参、人参、三七、瞿麦、甘草、远志、紫菀、地榆等许多中草药都含有本类皂甙。其甙元有五环三萜与四环三萜二种，五环三萜又可分为β-爱留米脂醇型（β-Amyrin）、a一爱留米脂醇型等多种类型。四环三萜又可分为羊毛脂醇型（Lanostero1）等多种类型。

②甾式皂甙（Steroid saponins）皂甙元为甾体衍生物，具27个碳原子。不具羧基，故又称中­性­皂甙。在碱­性­溶液中形成较稳定的泡沫，能被碱式醋酸铅试剂沉淀。本类皂甙主要存在于薯蓣科、百合科植物中，如各种薯蓣、七叶一枝花、土茯苓、知母、麦冬等。甾式皂甙因可作为合成甾体激素的原料而有重要意义。其甙元基本骨架为螺旋甾烷（Spirostane）。

（3）定­性­反应：

①取0．59药材粉末，加水5m1，煮沸浸出，过滤，浸出液放试管中激烈振摇，能产生持久（15分钟以上不消失）蜂窝状泡沫。

②取药材粉末1g加水数ml煮沸，过滤得水浸液，取1m1，加2％血球悬浮液5ml及生理食盐5ml摇匀，如放置5分钟后溶液变透明（溶血），示可能有皂甙存在。

③Libermann一Buehard反应: 药材粉末1g，加5～10ml 70％乙醇热浸、浸出液蒸­干­,浓硫酸一醋酐试剂1～2滴，颜­色­由黄-红-紫一蓝示可能有三萜皂甙，如继续变为绿­色­示可能有甾式皂甙存在。

（4）定量方法: 可用重量法、比­色­法或溶血指数法测定。溶血指数法较方便，但其结果受条件（如试管大小、溶液pH、温度。血液种类等）影响较大，故不够­精­确。简述方法如下：

①0．5％药材浸出液的配制：药材粉末以等渗磷酸盐缓冲液（或生理食盐水）­精­确配制成0．5％浓度。

②溶血指数的测定: 取直径、长短一致的9支小试管，分别­精­确吸入0.1、0.2、0.3、 ……0．9m1中草药浸出液，­精­密加缓冲液补足体积为1m1，各试管中再各­精­密加1ml 2％血球悬浮液，各管摇匀后由可以产生完全溶血的中草药最低浓度来计算溶血指数。

③皂甙含量的测定： 用标准皂甙（最好是同一药中提出的纯皂甙）配成适当浓度的溶液，同上法测定溶血指数，从标准皂甙与中草药浸出液的溶血指数计算中草药中皂甙的百分含量。

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